全自動型生物分子相互作用分析系統(tǒng) 

品牌介紹：

Nicoyalife成立于2014年，是滑鐵盧大學(xué)科技孵化器重點(diǎn)培養(yǎng)的納米科技公司，并獲得加拿大政府創(chuàng)新資金支持。Nicoyalife致力于納米光子學(xué)基礎(chǔ)上的傳感器技術(shù)研究，并推出創(chuàng)新的ILSPR技術(shù)*，為基礎(chǔ)研究，藥物研發(fā)及醫(yī)學(xué)診斷提供高靈敏的蛋白及分子互作分析儀器。美國號： US8693003 B2

全自動型生物分子相互作用分析系統(tǒng) 

產(chǎn)品介紹：

OpenSPR-XT將為科研及工業(yè)用戶帶來一款全自動，高通量的分子binding動力學(xué)SPR分析儀，大大加速用戶的研發(fā)過程。OpenSPR突出的性能和吸引力的價格，將*顛覆目前的全自動SPR市場。

OpenSPR-XT擁有*的納米傳感器技術(shù)，以廣受贊譽(yù)的OpenSPR作為檢測基礎(chǔ)，結(jié)合自動化工作站，提供高質(zhì)量的分子互作數(shù)據(jù)，如binding動力學(xué),吸附和蛋白，抗體，核酸，小分子等的特異性

應(yīng)用舉例：

多肽和鈣調(diào)蛋白結(jié)合動力學(xué)分析

鈣調(diào)蛋白CaM是一種能與鈣離子結(jié)合的蛋白質(zhì)。OpenSPR用來檢測野生型CaM和NOS肽的結(jié)合、解離速率及親和力。使用TraceDrawer 軟件處理數(shù)據(jù)，解離速率Koff:3.34x10-4 s-1 結(jié)合速率Kon 1.56x105M-1s-1、親和力常數(shù)KD 2.20 nM。結(jié)果與之前文獻(xiàn)報道的親和力常數(shù)相符。

前列腺特異抗原（PSA) 和抗體 (anti-PSA) 高親和力相互作用動力學(xué)分析

在很多研究領(lǐng)域中需要測定抗原-抗體結(jié)合動力常數(shù)。OpenSPR 方便用戶更準(zhǔn)確測定配體-抗原的結(jié)合動力學(xué)。OpenSPR用來測定前列腺特異抗原（prostate specific antigen ，PSA) 和抗體 (anti-PSA)的相互作用。PSA結(jié)合數(shù)據(jù)動力學(xué)擬合，得到解離速率Koff和結(jié)合速率Kon分別為

1.8x10-4 (+/-2.1x10-6) s-1，4.03x104(+/-9.16x102) M-1s-1，親和力KD為4.5nM.如圖1和圖2，與之前文獻(xiàn)報道的PSA和anit-PSA相互作用數(shù)據(jù)*。

由于相互作用解離速率慢，需要進(jìn)行單獨(dú)的解離實(shí)驗(yàn)。分3次加入300nM PSA，平均反應(yīng)為70pm +/-2.3pm,  傳感器反應(yīng)的重復(fù)性為 CV =3.2% 如右圖。

以上結(jié)果表明 OpenSPR可以準(zhǔn)確測定抗原抗體相互作用的動力學(xué)速率。

SPR分析生物素-鏈霉親和素相互作用

鏈霉親和素streptavidin 和 生物素biotin 的結(jié)合結(jié)果總結(jié)在Table 1 和 Figure 1中。當(dāng)streptavidin流過生物素化的傳感器表面，存在顯著濃度依賴。由于streptavidin 和 biotin結(jié)合的高親和力，沒有觀察到解離過程。 1 nM低濃度時(18 pm response)觀察到表明OpenSPR儀器的高靈敏性。1min內(nèi)信號的標(biāo)準(zhǔn)方差小于 2 pm，揭示了優(yōu)異的信噪比。

對照實(shí)驗(yàn)(Figure 2) 表明沒有biotin結(jié)合到表面上時， 500 nM 和 1000 nM時，streptavidin結(jié)合很少。然后用biotin激活表面，觀察到streptavidin結(jié)合。確認(rèn)傳感器是有活力的。

Streptavidin和金顆粒非特異結(jié)合，但running buffer的組成可以有效抑制任何非特異結(jié)合。

這些結(jié)果表明biotin-streptavidin 對于 OpenSPR系統(tǒng)使用者來說是個很優(yōu)異的分析體系。

技術(shù)參數(shù)